蛋白质样品质量的好坏直接影响到下游实验应用（WB、IP等），不同的实验对蛋白质样品的要求也不尽相同（天然蛋白/变性蛋白）。蛋白质样品制备时，大多实验室采用化学裂解法破坏细胞膜以释放细胞内的可溶性物质，化学裂解法主要采用裂解液处理，实验室常用的RIPA裂解液就属于化学裂解法。

RIPA裂解液的工作原理是利用去污剂等裂解细胞膜（包括核膜），从组织或细胞中抽取可溶性蛋白，RIPA裂解液的配制方法有很多种，其有效裂解成分主要是去污剂。去污剂（也称为表面活性剂）是细胞裂解液中必不可少的一种成分，起到了破坏脂质双分子层、破裂细胞以及溶解蛋白等作用。

针对不同的实验研究，市面上的RIPA裂解液根据去污剂种类及组分的不同分为强、中、弱等几类，但RIPA裂解液并不一定能满足你的实验需求。

RIPA 裂解组织或细胞会产生可溶性组分和不可溶性组分，并且在不可溶组分中仍存在蛋白。

不可溶组分中可能含有细胞骨架、细胞外基质的蛋白成分以及部分膜蛋白、核蛋白等，这部分蛋白的缺失可能会导致后续实验产生不可信、不稳定结果。

RIPA buffer solubilizes many, but not all,cellular proteins.(A) Examples of proteins that are entirely solubilized [100% in the supernatant(Sup)]. (B) Examples of proteins that are mostly solubilized (>90% Sup). (C)Examples of proteins that are partially solubilized (≤90% Sup). (D) Dimethyllysine4 histone H3 (H3K4me2) resides almost entirely in the RIPA-insolublepellet (Pel).(Sup:RIPA soluble fraction,Pel:RIPA insoluble fraction)

Kevin A. Janes,2015, SCIENCESIGNALING. doi:10.1126/scisignal. 2005966.

针对蛋白丢失问题，INVENT推出了柱式法蛋白提取技术，可有效的裂解组织/细胞，相比于RIPA裂解液可以得到更加完整的蛋白谱，避免蛋白的丢失，从而减少了蛋白质样品制备对下游实验的影响。

总的来说，Invent柱式法具有以下优点：

（1）优化裂解液配方——有效裂解蛋白包括难溶性蛋白、提高蛋白得率；

（2）离心柱技术——有效去除核酸以避免核酸对下游实验的干扰；

（3）天然蛋白裂解液/变性蛋白裂解液可供选择——满足不同实验的需求。

INVENT柱式法蛋白提取技术以高效、高质量品质已帮助众多科研者取得理想可靠的实验成果，若您有蛋白质样品制备问题请及时联系我们！